Прогностическая значимость выявления антигена ВИЧ р24 при использовании тест-систем с повышенной аналитической чувствительностью. Диагностика вич-инфекции Р24 анализ

Антиген к ВИЧ: что собой представляет, какую роль играет в диагностике?

Диагностика вируса иммунодефицита производится различными способами. Однако наибольшую популярность в последнее время набирают сверхчувствительные тест-систиемы. С их помощью удается выявить данный недуг на самых ранних этапах. Для этого используется антиген ВИЧ, присутствие которого в организме гарантированно указывает на неприятный и опасный диагноз. Для его обнаружение применяется несколько различных исследований.

Почему реакция ВИЧ 1, 2 антиген-антитела является наиболее достоверным показателем наличия вируса иммунодефицита?

Проверка на вирус иммунодефицита в государственных медицинских учреждениях является бесплатной. Но производится она в два этапа в том случае, если это необходимо. Изначально АГ к ВИЧ не проверяются. Первый анализ на предмет наличия или отсутствие данного заболевания направлен на выявление антител. Это ИФА-тестирование. Иммуноферментный анализ позволяет выявить людей, которые гарантировано не больны вирусом иммунодефицита (в том случае, если проверка проводилась по всем правилам).

А также условно инфицированных. Почему условно? Дело в том, что антитела к ВИЧ 1,2, в отличие от АГ к данному вирусу, выделяются в организме и по другим причинам. О чем конкретно идет речь. В первую очередь такое возможно при заболеваниях иммунной системы. При проблемах с этой жизненно важной системой организм в качестве защиты вырабатывает антитела, которые определяются посредством иммуноферментного анализа, как и те, что появляются при данном опасном недуге. Если результат ИФА оказывается положительными, больного направляют на дополнительное исследование, которое основано на выявлении реакции АГ – АТ 1,2 типа. В поликлиниках чаще всего используется иммунный блоттинг. Это самый распространенный тип анализа по обнаружению вируса иммунодефицита. С его помощью антиген и антитела к ВИЧ 1 и 2 не только выявляются, но и проверяются на прочность реакции.

Что такое антиген р24 к ВИЧ?

Прежде чем говорить о том, какими методами может быть выявлен hiv ag антиген ВИЧ, следует пояснить, что он собой представляет. Ученым давно удалось выяснить, что АГ, который маркируется в бланках анализов и в лабораториях маркировкой р24, является капсидом ретровируса. Говоря простыми словами, он является белком вируса иммунодефицита. Определение антигена ВИЧ невозможно без выявления антител первого и второго типа. Ведь АГ являются прочно связанными с антителами. Они образуются в организме в качестве иммунного ответа на появление АТ, которые, в свою очередь, являются своего рода «интервентами», направленными на разрушение иммунной системы и продуцирование опасного биологического материала.

АТ и АГ к ВИЧ 1 и 2 типа выявляются в реакции друг с другом. Первые выполняют в организме человека роль чужеродных молекул. Вторые служат своеобразными проявителями белков или полисахаридов. В случае с вирусом иммунодефицита АГ вызывают иммунный ответ. Соответственно, в медицине и науке, связанной с изучением данного заболевания, они классифицируются как иммуногены.

Р24 антиген ВИЧ 1 и 2 типа выявляются только посредством комплексного исследования биологического материала. Чаще всего для анализа используют венозную кровь. В некоторых случаях для этого подходит сперма или секреторная жидкость, выделяемая женскими половыми органами. Комбинированный анализ на ВИЧ антиген производится тремя известными способами. О каких конкретно исследованиях идет речь? Это иммунный блоттинг, комбо тест (hiv combo ВИЧ) и иммунохемилюминесцентный анализ. О каждом из них следует поговорить отдельно.

Иммунный блоттинг: антитела и антигены к ВИЧ 1 и 2

Как уже говорилось выше, иммунный блоттинг является одним из самых распространенных тестов, выявляющих антиген к ВИЧ. Каким образом он производится? Изначально у пациента берут кровь из вены. Обследование производится натощак. За тридцать – сорок минут до этого пациенту не рекомендуют курить. Суть исследования заключается в том, что если у человека в организме имеется вирус иммунодефицита 1 или 2 типа, реакция антиген – антитела является стойкой и неразрывной. Биологический материал испытуемого сначала расщепляют в специальном реактиве, затем помещают на стрипс, в качестве которого, как правило, выступает блистер с полистирольными ячейками. В результате добавления специальных реактивов, лаборант сначала выясняет, произойдет ли данная реакция, а затем при помощи неоднократных промывок крови, делает выводы о том, насколько стойкой она является. Это позволяет понять, имеется ли в организме вирус иммунодефицита, что в дальнейшем является самым важным фактором при постановке диагноза.

Анализ на ВИЧ АГ-АТ, производимый посредством иммунного блоттинга, рекомендуется сдавать не ранее, чем через четыре – пять недель после предполагаемого инфицирования. Несмотря на то, что этот тест является системой четвертого поколения, он не относится к сверхчувствительным и имеет погрешность в несколько процентов (от двух до трех).

Сверхчувствительный анализ: hiv duo ВИЧ (комбо) антитела 1, 2 типа

Анализ на ВИЧ (hiv) ag – ab (АГ-АТ) combo в отличие от иммунного блоттинга является сверхчувствительным. Специалисты в области медицины утверждают, что его применение целесообразно уже через две недели после предполагаемого инфицирования. Он направлен на исследование специфических антител, которые являются своеобразным иммунным ответом организма человека на такого интервента, как вирус иммунодефицита, а также АГ р24. Нiv duo ВИЧ антитела 1 и 2 типа также направлен на то, чтобы выявить антитела к данному опасному недугу. С его помощью удается не только обнаружить их в крови, но и определить тип заболевания.

Тест на антиген ВИЧ combo является комбинированным. С его помощью также проверяется реакция антиген-антитело, которая свидетельствует о наличии в организме страшного недуга.

Иммунохемилюминесцентный анализ: hiv 1,2 combo ВИЧ АТ-АГ ИХЛА

Тест ИХЛА на ВИЧ ат-аг также является сверхчувствительным. В основе такого исследования лежит своеобразная реакция АГ-АТ. Специфичность метода составляет порядка девяноста двух процентов, тогда как его достоверность – от девяноста восьми до девяноста девяти. Из этого можно сделать вывод о том, что погрешность у такого анализа есть, но она сравнительно невелика. И в случае необходимости легко перекрывается повторной проверкой. Применяется такой анализ уже через две или три недели после предполагаемого инфицирования.

Этот комбо тест на ВИЧ направлен на исследование венозной крови, в случае с проверкой на предмет наличия в организме вируса иммунодефицита. При выявлении других заболеваний и патологий используется моча или секреторная жидкость, которая выделяется из половых органов. АТ и АГ к вирусу иммунодефицита при ИХЛА также проверяются на реакцию. Для этого используются специальные реагенты и стрипс с ячейками. Проводимое в несколько этапов исследование позволяет быстро и точно установить диагноз или опровергнуть его.

Все вышеописанные способы диагностики вируса иммунодефицита посредством стойкой реакции АТ-АГ являются эффективными. Разнятся они лишь по допустимым срокам исследования. Решать, какой конкретно метод следует использовать, должен врач.

Анализ на ВИЧ / СПИД - антиген р24 в крови

Антиген р24 в сыворотке в норме отсутствует.

Антиген р24 - белок стенки нуклеотида ВИЧ. Стадия первичных проявлений после инфицирования ВИЧ - следствие начала репликативного процесса. Антиген р24 появляется в крови через 2 нед после инфицирования и может быть выявлен методом ИФА в период от 2 до 8 нед. Через 2 мес от начала инфицирования антиген р24 исчезает из крови. В дальнейшем в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечают второй подъём содержания в крови белка р24. Он приходится на период формирования СПИД.

Существующие тест-системы ИФА для детекции антигена р24 используют для раннего обнаружения ВИЧ у доноров крови и детей, определения прогноза течения заболевания и контроля за проводимой терапией. Метод ИФА обладает высокой аналитической чувствительностью, что позволяет обнаруживать антиген р24 ВИЧ-1 в сыворотке крови в концентрациях 5-10 пкг/мл и менее 0,5 нг/мл ВИЧ-2, и специфичностью. Вместе с тем следует отметить, что содержание антигена р24 в крови подвержено индивидуальным вариациям, а это значит, что только 20-30% пациентов можно выявить с помощью этого исследования в ранний период после инфицирования.

Антитела к антигену р24 классов IgM и IgG в крови появляются, начиная со 2-й недели, достигают пика в течение 2-4 нед и держатся на таком уровне различное время - антитела класса IgM в течение нескольких месяцев, исчезая в течение года после инфицирования, а антитела IgG могут сохраняться годами.

Медицинский эксперт-редактор

Портнов Алексей Александрович

Образование: Киевский Национальный Медицинский Университет им. А.А. Богомольца, специальность - «Лечебное дело»

Методы диагностики ВИЧ-инфекции

В настоящее время новые диагностические технологии позволяют выявить этиологические и патогенетические причины многих заболеваний и коренным образом повлиять на результаты лечения. Пожалуй, наиболее впечатляющие результаты внедрения этих технологий в клиническую практику достигнуты в области иммунологии и диагностики инфекционных заболеваний.

Тест-системы на основе иммуноферментного и иммунохемилюминесцентного анализа позволяют выявить антитела различных классов, что значительно повышает информативность методов клинической, аналитической чувствительности и специфичности для диагностики инфекционных заболеваний. Следует отметить, что наиболее значительные успехи в диагностике инфекций связаны с внедрением в лабораторную практику метода полимеразной цепной реакции, который считается «золотым стандартом» в диагностике и оценке эффективности проведенного лечения ряда инфекционных заболеваний.

Для исследования может быть использован различный биологический материал: сыворотка, плазма крови, соскоб, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость (СМЖ). В первую очередь, методы лабораторной диагностики инфекций направлены на выявление таких заболеваний, как вирусный гепатит В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекции, передающиеся половым путем (гонорейная, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная), туберкулез, ВИЧ-инфекция и др.

ВИЧ-инфекция – заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), длительное время персистирующего в лимфоцитах, макрофагах, клетках нервной ткани, в результате чего развивается медленно прогрессирующее поражение иммунной и нервной систем организма, проявляющееся вторичными инфекциями, опухолями, подострым энцефалитом и другими патологическими изменениями.

Возбудители инфекции – вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типов (ВИЧ-1, ВИЧ-2) – относятся к семейству ретровирусов, подсемейству медленных вирусов. Вирионы являются сферическими частицами диаметром 100–140 нм. Вирусная частица имеет наружную фосфолипидную оболочку, включающую гликопротеиды (структурные белки) с определенной молекулярной массой, измеряемой в килодальтонах. У ВИЧ-1 – это gpl60, gpl20, gp41. Внутренняя оболочка вируса, покрывающая ядро, также представлена белками с известной молекулярной массой – р17, р24, р55 (ВИЧ-2 содержит gpl40, gpl05, gp36, р16, р25, р55).

В состав генома ВИЧ входит РНК и фермент обратная транскриптаза (ревертаза). Для того чтобы геном ретровируса соединился с геномом клетки хозяина, вначале с помощью ревертазы происходит синтез ДНК на матрице вирусной РНК. Затем ДНК провируса встраивается в геном клетки-хозяина. ВИЧ обладает выраженной антигенной изменчивостью, значительно превышающей таковую у вируса гриппа.

В организме человека основной мишенью ВИЧ являются Т-лимфоциты, несущие на поверхности наибольшее количество СD4-рецепторов. После проникновения ВИЧ в клетку с помощью ревертазы по образцу своей РНК вирус синтезирует ДНК, которая встраивается в генетический аппарат клетки-хозяина (СD4-лимфоциты) и остается там пожизненно в состоянии провируса. Помимо Т-лимфоцитовхелперов поражаются макрофаги, В-лимфоциты, клетки нейроглии, слизистой оболочки кишечника и некоторые другие клетки. Причиной снижения количества Т-лимфоцитов (клетки CD4) является не только прямое цитопатическое действие вируса, но и их слияние с неинфицированными клетками. Наряду с поражением Т-лимфоцитов у больных с ВИЧ-инфекцией отмечается поликлональная активация B-лимфоцитов с увеличением синтеза иммуноглобулинов всех классов, особенно IgG и IgA, и последующим истощением этого отдела иммунной системы. Нарушение регуляции иммунных процессов проявляется также повышением уровня α-интерферона, β2-микроглобулина, снижением уровня IL-2. В результате нарушения функции иммунной системы, особенно при снижении числа Т- лимфоцитов (CD4) до 400 клеток в 1 мкл крови и менее, возникают условия для неконтролируемой репликации ВИЧ со значительным увеличением количества вирионов в различных средах организма. В результате поражения многих звеньев иммунной системы человек, зараженный ВИЧ, становится беззащитным перед возбудителями различных инфекций.

На фоне нарастающей иммунодепрессии развиваются тяжелые прогрессирующие заболевания, которые не встречаются у человека с нормально функционирующей иммунной системой. Это заболевания, которые Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) определила как СПИД-маркерные или СПИД-индикаторные заболевания.

Первая группа – заболевания, присущие только тяжелому иммунодефициту (уровень СD4 <200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

Вторая группа – заболевания, которые могут развиваться как на фоне тяжелого иммунодефицита, так и в ряде случаев без него.

Поэтому в этих случаях необходимо лабораторное подтверждение диагноза.

• кандидоз пищевода, трахеи, бронхов;
• внелегочный криптококкоз;
• криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца;
• цитомегаловирусные поражения различных органов помимо печени, селезенки или лимфоузлов у больного в возрасте старше 1 месяца;
• инфекция, обусловленная вирусом простого герпеса, проявляющаяся язвами на коже и слизистой оболочке, которые персистируют более 1 месяца, а также бронхитом, пневмонией или эзофагитом любой продолжительности, поражающим больного в возрасте старше 1 месяца;
• генерализованная саркома Капоши у больных в возрасте до 60 лет;
• лимфома головного мозга (первичная) у больных в возрасте до 60 лет;
• лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная дисплазия у детей в возрасте до 12 лет;
• диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями (микобактерии комплекса М. aviumintracellulare) со внелегочной локализацией или локализацией (дополнительно к легким) в коже, шейных лимфатических узлах, лимфатических узлах корней легких;
• пневмоцистная пневмония;
• прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;
• токсоплазмоз головного мозга у больных в возрасте старше 1 месяца.

• бактериальные инфекции, сочетанные или рецидивирующие, у детей в возрасте до 13 лет (более двух случаев за 2 года наблюдения): сепсис, пневмония, менингит, поражение костей или суставов, абсцессы, обусловленные гемофильными палочками, стрептококками;
• кокцидиоидомикоз диссеминированный (внелегочная локализация);
• ВИЧ-энцефалопатия (ВИЧ-деменция, СПИД-деменция);
• гистоплазмоз с диареей, персистирующей более 1 месяца;
• изоспороз с диареей, персистирующей более 1 месяца;
• саркома Капоши в любом возрасте;
• лимфома головного мозга (первичная) у лиц любого возраста;
• другие В-клеточные лимфомы (за исключением болезни Ходжкина) или лимфомы неизвестного иммунофенотипа: мелкоклеточные лимфомы (типа лимфомы Беркитта и др.); иммунобластные саркомы (лимфомы иммунобластные, крупноклеточные, диффузные гистиоцитарные, диффузные недифференцированные);
• микобактериоз диссеминированный (не туберкулез) с поражением помимо легких кожи, шейных или прикорневых лимфоузлов;
• туберкулез внелегочной (с поражением внутренних органов, помимо легких);
• сальмонеллезная септицемия, рецидивирующая;
• ВИЧ-дистрофия (истощение, резкое похудение).

Существует много классификаций СПИДа.

Согласно новой классификации, предложенной Центром по контролю за заболеваниями в США (табл. 2 – см. ссылку на источник выше), диагноз СПИДа устанавливается лицам, имеющим уровень CD4-лимфоцитов менее 200/мкл даже при отсутствии СПИД-индикаторных заболеваний.

Категория В включает различные синдромы, важнейшие из которых – бациллярный ангиоматоз, орофарингеальный кандидоз, рецидивирующий кандидозный вульвовагинит, трудно поддающийся терапии, цервикальная дисплазия, цервикальная карцинома, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, листериоз, периферическая нейропатия.

Антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в крови

Антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в сыворотке крови в норме отсутствуют.

Определение антител к ВИЧ является основным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. В основе метода лежит иммуноферментный анализ (ИФА) – чувствительность более 99,5%, специфичность – более 99,8%. Антитела к ВИЧ появляются у 90–95% инфицированных в течение 1 месяца после заражения, у 5–9% – через 6 месяцев, у 0,5–1% – в более поздние сроки. В стадии СПИДа число антител может снижаться вплоть до полного исчезновения.

Результат исследования выражается качественно: положительный или отрицательный.

Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в сыворотке крови. Отрицательный результат лаборатория выдает сразу по его готовности. При получении положительного результата – выявлении антител к ВИЧ – во избежание ложноположительных результатов в лаборатории анализ повторяют еще 2 раза.

Иммуноблоттинг на антитела к вирусным белкам ВИЧ в сыворотке крови

Антитела к вирусным белкам ВИЧ в сыворотке крови в норме отсутствуют.

Метод ИФА по определению антител к ВИЧ является скрининговым. При получении положительного результата для подтверждения его специфичности используется метод иммуноблоттинга – Western-blot – встречная преципитация в геле антител в сыворотке крови больного с различными вирусными белками, подвергнутыми разделению по молекулярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. Определяются антитела к вирусным белкам gp41, gpl20, gpl60, р24, pi8, р17 и др.

Согласно рекомендациям Российского центра по профилактике и борьбе со СПИДом обнаружение антител к одному из гликопротеидов gp41, gpl20, gpl60 – следует считать положительным результатом. В случае выявления антител к другим белкам вируса результат считается сомнительным, такого пациента следует обследовать дважды – через 3 и 6 месяцев.

Отсутствие антител к специфическим белкам ВИЧ означает, что иммуноферментный метод дал ложноположительный результат. Вместе с тем, в практической работе при оценке результатов метода иммуноблоттинга необходимо руководствоваться инструкцией, прилагаемой фирмой к используемому «Набору для иммуноблоттинга».

Метод иммуноблоттинга применяется для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции.

Антиген р24 в сыворотке крови

Антиген р24 в сыворотке крови в норме отсутствует.

Антиген р24 представляет собой белок стенки нуклеотида ВИЧ. Стадия первичных проявлений после инфицирования ВИЧ является следствием начала репликативного процесса. Антиген р24 появляется в крови спустя 2 недели после инфицирования и может быть выявлен методом ИФА в период от 2 до 8 недель. Через 2 месяца от момента инфицирования антиген р24 исчезает из крови. В дальнейшем в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечается второй подъем содержания в крови белка р24. Он приходится на период формирования СПИДа. Существующие тест-системы ИФА для детекции антигена р24 используются для раннего обнаружения ВИЧ у доноров крови и детей, определения прогноза течения СПИДа и контроля проводимой терапии у больных СПИДом. ИФА обладает высокой аналитической чувствительностью, что позволяет обнаруживать антиген р24 ВИЧ-1 в сыворотке крови в концентрации 5–10 пкг/мл и ВИЧ-2 – менее 0,5 нг/мл, и специфичностью. Однако следует отметить, что уровень антигена р24 в крови подвержен индивидуальным вариациям, а это значит, что только 20–30% пациентов могут быть выявлены с помощью данного исследования в ранний период после инфицирования (Rose N.R. et al., 1997).

Антитела к антигену р24 классов IgM и IgG в крови появляются со 2-й недели, достигают пика в течение 2–4 недель и удерживаются на таком уровне различное время: антитела класса IgM – в течение нескольких месяцев, исчезая в течение одного года после инфицирования, а антитела IgG могут сохраняться годами.

Алгоритм диагностики ВИЧ-инфекции зависит от фазы заболевания и характеризуется изменением динамики детекционных антител различных классов (рис. 1, 2 – см. ссылку на источник выше).

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и антигена р24 в сыворотке крови.

Отрицательный результат лаборатория выдает сразу по его готовности. При получении положительного результата – выявлении антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и/или антигена р24 – во избежание ложноположительных результатов в лаборатории анализ повторяют еще 2 раза.

Вне зависимости от полученных результатов исследования проба крови пациента и результаты 3 исследований направляются лабораторией в региональный центр СПИДа для подтверждения положительного результата или верификации неопределенного результата. В таких случаях окончательный ответ по данному исследованию выдает региональный центр СПИДа.

Обнаружение ВИЧ методом полимеразной цепной реакции (качественно)

Обнаружение ВИЧ методом полимеразной цепной реакции – ПЦР (качественно) проводится с целью:

• разрешения сомнительных результатов иммуноблоттингового исследования;
• для ранней диагностики инфицирования ВИЧ;
• контроля эффективности противовирусного лечения;
• определения стадии заболевания СПИДом (переход инфицированности в заболевание).

При первичном инфицировании ВИЧ метод ПЦР позволяет выявить РНК ВИЧ в крови уже спустя 10–14 суток после инфицирования.

Результат исследования выражается качественно: положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие РНК ВИЧ в крови.

Положительный результат – выявление РНК ВИЧ – свидетельствует об инфицировании пациента.

Обнаружение ВИЧ методом полимеразной цепной реакции (количественно)

ВИЧ в крови в норме отсутствует.

Прямое количественное определение РНК ВИЧ с помощью ПЦР позволяет более точно, чем определение содержания клеток CD4, предсказать скорость развития СПИДа у лиц, инфицированных ВИЧ, следовательно – более точно оценить их выживаемость. Высокое содержание вирусных частиц обычно коррелирует с выраженным нарушением иммунного статуса и низким содержанием клеток CD4. Низкое содержание вирусных частиц обычно коррелирует с более благополучным иммунным статусом и более высоким содержанием клеток CD4. Содержание вирусной РНК в крови позволяет предсказать переход заболевания в клиническую стадию. При содержании РНК-1 ВИЧ >копий/мл почти у всех пациентов развивается клиническая картина СПИДа (Senior D., Holden Е., 1996).

Вероятность развития СПИДа в 10,8 раз выше у лиц с содержанием ВИЧ-1 в крови >копий/мл, чем у лиц с содержанием ВИЧ-1 в крови <копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

Группой экспертов США разработаны показания для терапии пациентов с ВИЧ. Лечение показано пациентам с количеством клеток CD4 в крови <300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >копий/мл (ПЦР). Оценка результатов антиретровирусной терапии у лиц, инфицированных ВИЧ, проводится по снижению уровня сывороточной РНК ВИЧ.

При эффективном лечении уровень виремии должен снижаться в 10 раз в течение первых 8 недель и быть ниже предела чувствительности метода (ПЦР) (<500 копий/мл) через 4–6 месяцев после начала терапии.

Таким образом, на сегодняшний день в клиническую практику для диагностики ВИЧ-инфекции внедрены и используются множество методов исследования, как и для всех других вирусных инфекций. Среди них ведущая роль отводится серологическим исследованиям. Основные методы диагностики ВИЧ-инфекций представлены в таблице 3 (см. ссылку на источник выше), где они разделены в зависимости от важности каждого метода для выявления вирусов на четыре уровня:

• А – тест обычно используется для подтверждения диагноза;
• В – тест полезен в определенных обстоятельствах для диагностики отдельных форм инфекции;
• С – тест редко используется для целей диагностики, но имеет большое значение для эпидемиологических обследований;
• D – тест обычно не используется лабораториями в диагностических целях.

Поскольку для диагностики вирусных инфекций помимо выбора оптимального метода анализа не менее важно правильное определение и взятие биоматериала для исследования, в таблице 4 (см. ссылку на источник выше) приведены рекомендации по выбору оптимального биоматериала для исследования ВИЧ-инфекции.

Для мониторинга ВИЧ-инфицированных следует использовать возможности комплексного исследования иммунного статуса – количественное и функциональное определение всех его звеньев: гуморального, клеточного иммунитета и неспецифической резистентности в целом.

В современных лабораторных условиях многоэтапный принцип оценки иммунологического статуса включает определение субпопуляции лимфоцитов, иммуноглобулинов крови. При оценке показателей следует учитывать, что для ВИЧ-инфекции характерно снижение соотношения CD4/CD8 Т-клеток меньше 1. Индекс CD4/CD8 1,5-2,5 –указывает на нормергическое состояние, более 2,5 – указывает на гиперактивность, менее 1,0 – свидетельствует об иммунодефиците. Также соотношение CD4/CD8 может быть меньше 1 при тяжелом течении воспалительного процесса.

Принципиальное значение это соотношение имеет при оценке иммунной системы у больных СПИДом, потому что ВИЧ избирательно поражает и разрушает СD4-лимфоциты, в результате чего соотношение CD4/CD8 понижается до значений, значительно меньше 1.

Оценка иммунологического статуса опирается также на выявление общих или «грубых» дефектов в системе клеточного и гуморального звена иммунитета: гипергаммаглобулинемия (повышение концентрации IgA, IgM, IgG) или гипогаммаглобулинемия в терминальной стадии; увеличение концентрации циркулирующих иммунных комплексов; снижение продукции цитокинов; ослабление ответа лимфоцитов на антигены и митогены.

Нарушение соотношения популяций в общем пуле В-лимфоцитов характерно для недостаточности гуморального иммунитета. Однако эти изменения неспецифичны для ВИЧ-инфекции и могут возникать и при других заболеваниях. В комплексной оценке ряда других лабораторных показателей следует учитывать, что для ВИЧ-инфекции характерны также: анемия, лимфо- и лейкопения, тромбоцитопения, повышение уровня β2-микроглобулина и С-реактивного протеина, повышение активности трансаминаз в сыворотке крови.

Антиген р24 в сыворотке крови

Аг р24 в сыворотке в норме отсутствует.

Аг р24 - белок стенки нуклеотида ВИЧ. Стадия первичных проявлений после инфицирования ВИЧ - следствие начала репликативного процесса. Аг р24 появляется в крови через 2 нед после инфицирования и может быть выявлен методом ИФА в период от 2 до 8 нед. Через 2 мес от начала инфицирования Аг р24 исчезает из крови. В дальнейшем в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечают второй подъём содержания в крови белка р24. Он приходится на период формирования СПИД. Существующие тест-системы ИФА для детекции Аг р24 используют для раннего обнаружения ВИЧ у доноров крови и детей, определения прогноза течения заболевания и контроля за проводимой терапией. Метод ИФА обладает высокой аналитической чувствительностью, что позволяет обнаруживать Аг р24 ВИЧ-1 в сыворотке крови в концентрациях 5-10 пкг/мл и менее 0,5 нг/мл ВИЧ-2, и специфичностью. Вместе с тем следует отметить, что содержание Аг р24 в крови подвержено индивидуальным вариациям, а это значит, что только 20-30% пациентов можно выявить с помощью этого исследования в ранний период после инфицирования.

АТ к Аг р24 классов IgM и IgG в крови появляются, начиная со 2-й недели, достигают пика в течение 2-4 нед и держатся на таком уровне различное время - АТ класса IgM в течение нескольких месяцев, исчезая в течение года после инфицирования, а АТ IgG могут сохраняться годами.

Появление классов АТ на различных стадиях ВИЧ-инфекции представлено на Рис.

Рис. Появление классов АТ на различных стадиях ВИЧ-инфекции

Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo)

Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo) - полное описание диагностики, показания к выполнению, расшифровка результатов.

Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo) – антитела, образовавшиеся в организме при инфицировании вирусом иммунодефицита человека.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) представитель семейства ретровирусов, он повреждает клетки иммунной системы. Вирус бывает двух типов, ВИЧ-1 встречается чаще, ВИЧ-2 – преимущественно в странах Африки.

ВИЧ встраивается в клетки человека, вирусные частицы размножаются, в результате на поверхности клеток появляются антигены вируса, к которым и вырабатываются соответствующие антитела. Их обнаружение в крови позволяет поставить диагноз ВИЧ-инфекции.

Выявить антитела к вирусу иммунодефицита человека можно через три-шесть недель после проникновения вируса в кровь. Резкое увеличение вируса в крови характерно для стадии первичных проявлений, этот период приходится на третью-шестую неделю с момента инфицирования и называется «сероконверсией». В это время инфекцию можно выявить лабораторно, а клинически она либо не проявляется вообще, либо протекает как простудное заболевание с увеличением лимфатических узлов.

Через 12 недель от момента заражения антитела обнаруживаются практически у всех заболевших. На последней стадии заболевания, называемой СПИД, количество антител уменьшается.

На каком сроке с момента заражения будет обнаружена ВИЧ-инфекция, зависит от тест-системы, применяемой в конкретной лаборатории. Комбинированные тест-системы четвертого поколения обнаруживают ВИЧ-инфекцию через две недели с момента попадания в кровь вируса. А тест-системы первого поколения обнаруживали ВИЧ лишь спустя 6-12 недель.

При выполнении комбинированного анализа возможно выявление антигена р24 ВИЧ, который является капсидом вируса. Он определяется в крови спустя 1-4 недели после инфицирования, ещё до нарастания концентрации антител в крови (до «сероконверсии»). Также при комбинированном исследовании обнаруживаются антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, доступные для диагностики через две-восемь недель после инфицирования.

До сероконверсии в крови обнаруживаются и р24, и антитела к ВИЧ-1, к ВИЧ-2. После сероконверсии антитела связывают антиген р24, поэтому р24 не обнаруживается, а антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 выявляются. Затем в крови снова обнаруживаются и р24, и антитела к ВИЧ-1, к ВИЧ-2. Когда у ВИЧ-инфицированного развивается СПИД, выработка антител нарушается, поэтому антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 могут отсутствовать.

Диагностика ВИЧ-инфекции проводится на этапе планирования беременности и при текущем наблюдении беременной женщины, поскольку ВИЧ-инфекция может передаваться от женщины к плоду во время беременности, в родах и при грудном вскармливании.

Показания к выполнению ВИЧ диагностики

Случайные половые контакты.

Лихорадка без объективных причин.

Увеличение лимфатических узлов в нескольких анатомических областях.

Подготовка к исследованию

Исследование на ВИЧ проводят через 3-4 недели от момента предполагаемого заражения. Если результат отрицателен, анализ повторяют через три и шесть месяцев.

От последнего приёма пищи до взятия крови временной промежуток должен быть более восьми часов.

Накануне исключить из рациона питания жирные продукты, не принимать спиртные напитки.

За 1 час перед взятием крови на анализ нельзя курить.

Кровь на исследование сдают утром натощак, исключается даже чай или кофе.

Допустимо пить обычную воду.

Материал для исследования

Расшифровка результатов ВИЧ диагностики

Анализ является качественным. Если антитела к ВИЧ не обнаружены, в ответе указано «отрицательно».

Если антитела к ВИЧ обнаруживаются, анализ повторяют с другой серией тестов. Повторный положительный результат требует проведения исследования методом иммуноблота, «золотого стандарта» ВИЧ-диагностики.

1. Человек не инфицирован ВИЧ.
2. Терминальная стадия ВИЧ-инфекции (СПИД).
3. Серонегативный вариант ВИЧ-инфекции (позднее образование антител к ВИЧ).

1. Человек инфицирован ВИЧ.
2. Тест не информативен у детей до полутора лет, рождённых от ВИЧ-инфицированных матерей.
3. Ложноположительный результат при наличии в крови антител к вирусу Эпштейна-Барр, главному комплексу гистосовместимости, ревматоидному фактору.

Выберите беспокоящие вас симптомы, ответьте на вопросы. Выясните, насколько серьезна ваша проблема и нужно ли обращаться к врачу.

Перед использованием информации, предоставляемой сайтом medportal.org, пожалуйста, ознакомьтесь с условиями пользовательского соглашения.

Пользовательское соглашение

Сайт medportal.org предоставляет услуги на условиях, описанных в настоящем документе. Начиная пользоваться веб-сайтом Вы подтверждаете, что ознакомились с условиями настоящего Пользовательского соглашения до начала пользования сайтом, и принимаете все условия данного Соглашения в полном объеме. Пожалуйста, не пользуйтесь веб-сайтом, если Вы не согласны с данными условиями.

Вся информация, размещённая на сайте, носит справочный характер, информация взята из открытых источников является справочной и не является рекламой. Сайт medportal.org предоставляет услуги, позволяющие Пользователю производить поиск лекарственных средств в данных, полученных от аптек в рамках соглашения между аптеками и сайтом medportal.org. Для удобства пользования сайтом данные по лекарственным средствам, БАД систематизируются и приводятся к единому написанию.

Сайт medportal.org предоставляет услуги, позволяющие Пользователю производить поиск клиник и другой информации медицинского характера.

Размещенная в результатах поиска информация не является публичной офертой. Администрация сайта medportal.org не гарантирует точность, полноту и (или) актуальность отображаемых данных. Администрация сайта medportal.org не несет ответственности за вред или ущерб, который Вы могли понести от доступа или невозможности доступа к сайту или от использования или невозможности использования данного сайта.

Принимая условия настоящего соглашения, Вы полностью понимаете и соглашаетесь с тем, что:

Информация на сайте носит справочный характер.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия ошибок и расхождений относительно заявленного на сайте и фактического наличия товара и цен на товар в аптеке.

Пользователь обязуется уточнить интересующую его информацию телефонным звонком в аптеку или использовать предоставленную информацию по своему усмотрению.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия ошибок и расхождений относительно графика работы клиник, их контактных данных – номеров телефонов и адресов.

Ни Администрация сайта medportal.org, ни какая-либо другая сторона, вовлеченная в процесс предоставления информации, не несет ответственности за вред или ущерб, который Вы могли понести от того, что полностью положились на информацию, изложенную на этом веб-сайте.

Администрация сайта medportal.org предпринимает и обязуется предпринимать в дальнейшем все усилия для минимизации расхождений и ошибок в предоставленной информации.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия технических сбоев, в том числе в отношении работы программного обеспечения. Администрация сайта medportal.org обязуется в максимально короткие сроки предпринять все усилия для устранения каких-либо сбоев и ошибок в случае их возникновения.

Пользователь предупрежден о том, что Администрация сайта medportal.org не несет ответственности за посещение и использование им внешних ресурсов, ссылки на которые могут содержаться на сайте, не предоставляет одобрения их содержимого и не несет ответственности за их доступность.

Администрация сайта medportal.org оставляет за собой право приостановить действие сайта, частично или полностью изменить его содержание, внести изменения в Пользовательское соглашение. Подобные изменения осуществляются только на усмотрение Администрации без предварительного уведомления Пользователя.

Вы подтверждаете, что ознакомились с условиями настоящего Пользовательского соглашения, и принимаете все условия данного Соглашения в полном объеме.